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以下所述中使用的曲線(xiàn)繪制軟件為Curve E xpert1.4, 各位老師們?nèi)缬行枰纯?span style="font-family:微軟雅黑;">點(diǎn)擊此鏈接下載自行下載使用；

可以采用各種繪圖軟件來(lái)繪制 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，下面以“Curve Expert1.4”軟件為例，繪制 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的方法如下；

1．啟動(dòng)“Curve Expert”

2．X 軸輸入標(biāo)準(zhǔn)品的 OD 值（雙抗夾心輸入 OD-空白值），Y 軸輸入所對(duì)應(yīng)的濃度值，如圖：

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3．單擊[運(yùn)行]按鈕，出現(xiàn)如下對(duì)話(huà)框

4．單擊[ok]按鈕，出現(xiàn)如下兩個(gè)對(duì)話(huà)框，關(guān)閉下面一個(gè)對(duì)話(huà)框

5. 在對(duì)話(huà)框的右上角出現(xiàn)一些曲線(xiàn)的名稱(chēng)，從“1”開(kāi)始依次點(diǎn)擊曲線(xiàn)名稱(chēng)，在右下角會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)擬合的曲線(xiàn)。（一般選擇第一個(gè)多項(xiàng)式擬合）

6. 根據(jù)擬合的曲線(xiàn)選取 ELISA 擬合度最佳的曲線(xiàn)雙擊，出現(xiàn)如下對(duì)話(huà)框：注意：選擇系數(shù)（即“r”值）最好的曲線(xiàn)方程來(lái)進(jìn)行運(yùn)算。

在下面的對(duì)話(huà)框 右上角有“r”值，當(dāng)“r”值越接近 1 擬合度越好

7．按[Ctrl]鍵+[L]鍵，出現(xiàn)如下對(duì)話(huà)框：

8．輸入標(biāo)準(zhǔn)的 OD 值，單擊[Calculate]按忸，即可得到待測(cè)蛋白的實(shí)際含量（標(biāo)本稀釋了 N 倍，運(yùn)算出的數(shù)值應(yīng)在乘以 N）。?

9. 如想得到 ELISA 擬合曲線(xiàn)的方程，可在步驟 6 的對(duì)話(huà)框空白處右擊，選擇”Information”

10. 得到如下對(duì)話(huà)框：點(diǎn)擊“Copy”

在你需要的位置粘貼即可得到如下數(shù)據(jù)：

Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)?

Coefficient Data:?

a = -21.531017?

b = 212.05019?

c = -0.24054479 d = 0.018060778?

11. 修改作圖中 X,Y 坐標(biāo)軸高度以及相關(guān)屬性 選擇步驟 9 所示圖中的第二排“Graph Properties”，修改好后點(diǎn)擊 OK 保存

1、樣品的濃度是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算出來(lái)的，所以要嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)指示進(jìn)行操作，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)能直接反映操作是否準(zhǔn)確。